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氣相柱知識

氣相色譜分離條件優(yōu)化

氣相色譜分離條件的優(yōu)化主要包括進(jìn)樣量、進(jìn)樣口溫度、色譜柱溫度和檢測器靈敏度等參數(shù)的調(diào)整。具體步驟如下:


1. 確定初始操作條件:進(jìn)樣量要根據(jù)樣品濃度、色譜柱容量和檢測器靈敏度來確定。樣品濃度不超過mg/ml時(shí),填充柱的進(jìn)樣量通常為1~5μL,而對于毛細(xì)管柱,若分流比為50:1時(shí),進(jìn)樣量一般不超過2μL。如果這樣的進(jìn)樣量不能滿足檢測靈敏度的要求,可考慮加大進(jìn)樣量,但以不超載為限。進(jìn)樣口溫度主要由樣品的沸點(diǎn)范圍決定,還要考慮色譜柱的使用溫度。即首先要保證待測樣品全部氣化,其次要保證氣化的樣品組分能夠全部流出色譜柱,而不會在柱中冷凝。原則上講,進(jìn)樣口溫度高一些有利,一般要接近樣品中沸點(diǎn)最高的組分的沸點(diǎn),但要低于易分解組分的分解溫度,常用的條件是250~350℃。實(shí)際操作中,進(jìn)樣口溫度可在一定范圍內(nèi)設(shè)定,只要保證樣品完全汽化即可,而不必進(jìn)行很精確的優(yōu)化。注意,當(dāng)樣品中某些組分會在高溫下分解時(shí),就應(yīng)適當(dāng)降低汽化溫度。必要時(shí)可采用冷柱上進(jìn)樣或程序升溫汽化(PTV)進(jìn)樣技術(shù)。

2. 調(diào)整色譜柱溫度:色譜柱溫度的確定主要由樣品的復(fù)雜程度和汽化溫度決定。原則是既要保證待測物的完全分離,又要保證所有組分能流出色譜柱,且分析時(shí)間越短越好。組成簡單的樣品最好用恒溫分析,這樣分析周期會短一些。特別是用填充柱時(shí),恒溫分析時(shí)色譜圖的基線要經(jīng)程序升溫時(shí)穩(wěn)定得多。對于組成復(fù)雜的樣品,常需要用程序升溫分離,因?yàn)樵诤銣貤l件下,如果柱溫較低,則低沸點(diǎn)組分分離得好,而高沸點(diǎn)組分的流出時(shí)間會太長,造成峰展寬,甚至滯留在色譜柱中造成柱污染;反之,當(dāng)柱溫太高時(shí),低沸點(diǎn)組分又難以分離。毛細(xì)管柱的一個(gè)最大優(yōu)點(diǎn)就是可在較寬的溫度范圍內(nèi)操作,這樣既保證了待測組分的良好分離,又能實(shí)現(xiàn)盡可能短的分析時(shí)間。一般來講,色譜柱的初始溫度應(yīng)接近樣品中zui輕組分的沸點(diǎn),而最終溫度則取決于zui重組分的沸點(diǎn)。升溫速率則要依樣品的復(fù)雜程度而定。


通過以上步驟的調(diào)整和優(yōu)化,可以得到最佳的氣相色譜分離條件。需要注意的是,在實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)該注意安全問題,避免高溫或有毒物質(zhì)對實(shí)驗(yàn)人員造成傷害或環(huán)境污染。同時(shí),應(yīng)該根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)條件和樣品性質(zhì)進(jìn)行條件優(yōu)化,以達(dá)到最佳的分離效果。

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